邮件的主题设计对整个邮件营销起到了很大的作用，为了让邮件主题发挥最佳的效果，在尽可能保证邮件主题符合基本原则的前提下，还需要对邮件主题进行一定的测试。尤其对于重要的邮件，更有必要通过测试来进一步确认邮件主题是否最优。如果可能，拟订几个不同的邮件主题，分别征求部分用户的意见，从中选择一个最优的主题。如果邮件列表中的用户有明显的细分特征，最好针对不同的潜在用户群体，分别设计有针对性的邮件内容和邮件主题。
做邮件营销的都知道，电子邮件主题体现出邮件内容的精华是很重要的，有价值的信息可以增加用户的信心。通过邮件主题来让其感觉到邮件内容的价值，并迅速做出打开邮件详细阅读的决定。只有用户肯定了我们的内容，我们才能把邮件营销做好。电子邮件主题需要体现出发件人信息中无法包含的内容，因为发件人中除了显示的发件人名称和邮件地址之外，很难容纳更为详尽的信息。对发件人的信任还需要通过邮件主题来进一步强化。将邮件主题的空间留出一部分来推广品牌是很有必要的，尤其在用户对于企业品牌信任程度不高的情况下更是如此。邮件主题需要尽可能将重要的营销信息如有独特价值的产品、信息或者给人印象深刻的品牌等内容展示出来，即使用户不阅读邮件内容也会留下一定印象。这是可以监测到的意外效果。电子邮件主题最好含有丰富的关键词，除了增加用户的印象之外，也是为了让用户在检索收件箱中的邮件时增加被发现的机会。因为部分用户收到邮件后并不一定马上对邮件中的信息做出回应，有些甚至可能在1个月之后才突然想到曾经收到过某个邮件中含有自己所需要的信息。电子邮件主题不宜过于简单或过于复杂，尽管没有严格的标准来限制邮件主题的字数，但保持在一定合理的范围之内，既能反映出比较重要的信息，又不至于在邮件主题栏默认的宽度内看不到有价值的信息。一般说来，电子邮件主题保持在8-20个汉字范围内是比较合适的。